OSN-SAbstraktOSN-E

Screening protilátek technologií Luminex xMAP (extentended Multi Analyte Profiling, technologie původně vyvinutá Luminex Corp.) je multiplexní imunoanalýza, která kombinuje principy imunoanalýzy na pevné fázi a průtokové cytometrie. Test využívá fluorescenčně označené mikrokuličky (beads), na jejichž povrchu jsou navázané specifické antigeny nebo jiné zachytávací molekuly.

Například pro test LMX, detekující anti-HLA protilátky, jsou použity purifikované HLA antigeny, kdy jednotlivé populace mikrokuliček nesou definované HLA antigeny I. nebo II. třídy.

V testu Pak-Lx jsou mikrokuličky potaženy specifickými trombocytárními antigeny, zejména epitopy lokalizovanými na membránových glykoproteinech trombocytů, které mohou být i rekombinantně připravené.

Každá skupina mikrokuliček má vlastní „barevný kód“ (poměr dvou fluorescenčních barviv v mikrokuličce) pro rozlišení, jaké antigeny nese.

Do směsi kuliček se přidá sérum pacienta. Pokud sérum obsahuje protilátky proti některému antigenu na kuličce, navážou se na něj. V dalším kroku se přidává anti-human IgG protilátka, značená nejčastěji phycoerythrinem (PE). Detekce probíhá v analyzátoru na principu průtokové fluorescenční analýzy, kdy každá kulička projde dvěma lasery. 1. klasifikační laser identifikuje fluorescenční kód kuličky (jaký antigen nese) a 2. laser změří intenzitu PE fluorescenčního signálu (tj. informace o tom, kolik protilátky se navázalo). Výsledkem je hodnota fluorescence, zvlášť pro každou populaci kuliček, nejčastěji udávanou jako MFI (Mean Fluorescence Intensity).

OSN-SSouvisející informaceOSN-E

OSN-STextOSN-E

OSN-SPoznámkyOSN-E

OSN-SAppendixyOSN-E

OSN-SLiteraturaOSN-E

OSN-SAutorské poznámkyOSN-E